REPORTE DE CASO
Diagnóstico y tratamiento de un tumor de células de la granulosa en una yegua criolla colombiana
Diagnostic and treatment of the granulosa cell tumor of colombian mare creole
MORA V., MVZ, MSc. (In memorian q.e.p.d.); FUENTES E., MVZ, MSc PhD; GONGORA A., MV MSc, Dr Sci. Escuela de Medicina Veterinaria y Zootecnia Universidad de los Llanos. A.A 2621, Villavicencio Meta Colombia. agongora@unillanos.edu.co
Recibido: Agosto, 27 de 2004 - Aprobado: Diciembre, 2 de 2004
R E S U M E N
Los tumores ováricos son de relativa importancia en la práctica reproductiva equina, dentro de estos, el tumor de las células de la granulosa (TCG) es el de mayor presentación, aunque no se conoce con profundidad la patogénesis. Se sugiere que la falla en la ovulación mas otros factores adicionales pueden tener importancia. Este artículo describe los signos clínicos, ultrasonografía, niveles hormonales, histopatología, diagnóstico y tratamiento de un TCG en una yegua criolla colombiana llevada para consulta a la clínica de grandes animales de la Universidad de los Llanos. La descripción de este caso podría servir de ayuda a los clínicos particulares en la orientación objetiva del diagnóstico, ante nuevos reportes, dado el significativo crecimiento de esta industria.
Palabras clave: equino, neoplasia, células de la granulosa, reproducción.
A B S T R A C T
The ovarian tumors are of relative importance in the practices it reproductive equine, inside these, the granulosa cell tumors (TCG) it is that of more presentation, although one doesn’t know with depth the pathogenesis. It is suggested that the fails in the ovulation but other additional factors can have importance. In this article case of equine granulosa cell tumors is reported, diagnosed by the clinical signs, ultrasonographic examination, hormonal levels, histopathology, diagnosis and treatment of a TCG in a Colombian Creole Mare taken for consultation to the clinic of big animals of the Llanos University. The description of this case could serve from help to the practitioner clinical in the objective orientation of the diagnosis, before new reports, given the significant growth of this industry.
Key words: Equine, Mare, Granulosa Cell tumors, Reproduction.
I N T R O D U C C I Ó N
El desarrollo de una neoplasia es el resultado de una serie de eventos, en el cual confluyen varias mutaciones y un proceso de selección natural hacia una determinada población celular, lo que permite su proliferación incontrolada y por ende la formación del tumor. Los reareglos de oncogenes y genes supresores de tumor, están implicados en la regulación de la proliferación, diferenciación y apoptosis celular (Saundefedt 1999).
En la práctica reproductiva equina las neoplasias del tracto reproductivo son relativamente frecuentes (Jones et al., 1979; Nielsen y Kennedy 1990). Dentro de los tumores del ovario, el tumor de las células de la granulosa (TCG) es él más común, y afecta a las yeguas principalmente entre los 5 y 7 anos de edad, caracterizado por ser unilateral, hormonalmente activo e induce cambios importantes en el comportamiento reproductivo de la yegua (McCue, 1992; McCue, 2000; Chopin et al., 2002), también se reportan con menor frecuencia el cistadenoma como un tumor de la superficie epitelial ovárica, sin ser hormonalmente activo (.Hinrichs et al., 1989; Hughes ety al., 1980). Otros tumores de menor presentación son el teratoma y disgerminoma, el primero de naturaleza benigna y el segundo maligno (Frazer, y Threlfall, 1986; Mcentee, 1990)
El TCG desencadena principalmente tres tipos de comportamiento en la yegua, i) comportamiento agresivo o de macho, al quedar en contacto con otros animales. ii) estro continuo o irregulares (Ninfomanía). iii) anestro. Las yeguas que presentan un TCG, presentan elevados niveles de testosterona plasmática, dado a un mecanismo de retroalimentación negativo sobre la hipófisis.
D E S C R I P C I Ó N D E L C A S O
Se recibió para consulta en la clínica de grandes animales de la Universidad de los Llanos, una yegua criolla de paso fino colombiano color zaino, de 6 años de edad con peso de 319 kg en aparente buen estado de salud, con antecedentes de anestro e infertilidad y alteración en el comportamiento durante los últimos 18 meses. Al examen clínico las constantes fisiológicas se encontraron dentro de los valores normales. A la palpación rectal se encontró un útero de apariencia normal, el ovario (derecho) presentó una consistencia dura con aumento exagerado de tamaño. El ovario contralateral se palpo pequeño e inactivo.
Evaluación ultrasonográfica
El examen ultrasonográfico transrectal con sonda lineal de 5.0 y 7.5 MHz (Piemedical 200R ), evidenció un ovario agrandado mayor de 10 cm de diámetro, el tumor de células de la granulosa tenía la apariencia de un ovario transicional conteniendo numerosos folículos anecogénicos de menos de 25 mm de tamaño, a manera de una estructura poliquística semejante a un panel de abejas, mayor de 10 cm de longitud x 8 cm de ancho. Figura 1. El ovario contralateral se observó pequeño e inactivo menor de 4 cm de diámetro, homogéneo, moderadamente de estructura ecogénica con folículos anecogénicos menores de 10 mm.
Figura 1. Ultrasonografia de ovario derecho de una yegua criolla Obsérvese Masa tumoral de 7.57 cm de ancho de apariencia poliquística, no abarcable en toda su extensión por el transductor
Determinación de Testosterona plasmática
Se tomó una muestra de sangre de la vena yugular en tubo vacutainerR estéril sin anticoagulante, el suero extraído fue enviado a un laboratorio clínico para seres humanos, especializado para la determinación de testosterona mediante un Kit comercial ELISA- Inmunofluorescencia, utilizando un lector MinividasR. encontrando niveles de 100 pg/ml.
Diagnóstico
El diagnóstico del TCG fue realizado con base a las alteraciones del comportamiento de la Diagnóstico yegua, signos clínicos, hallazgos a la palpación, examen ultrasonográfico transrectal, histopatología y por los altos niveles de testosterona plasmática.
Procedimiento Quirúrgico
Previo ayuno de 24 horas, se realizó medicación preanestésica con xilazina y valium a una dosis de 0.5 y 0.01 mg/kg IV respectivamente y anestesia general con clorhidrato de ketamina a una dosis de 2.0 mg/kg IV y mantenimiento durante el tiempo que duró la intervención quirúrgica con la mitad de la dosis inicial. El abordaje quirúrgico fue paramedial diagonal a nivel del vientre, al lado respectivo donde se encontraba el ovario afectado.
La apariencia macroscópica del ovario extraído reveló un aumento exagerado de tamaño, de consistencia dura, de color amarillo a naranja sin presencia de la fosa de la ovulación y altamente vascularizado con un peso de 220 gr. Figura 3. Al corte con bisturí se observó la presencia de quistes llenos de fluido seroso y sanguinolento Figura 4.
En el postoperatorio se prescribió flumixin meglumina a la dosis de 1.1mg/kg de peso vivo vía IM por 4 días y Dalipen® 6: 6-Penicilina sódica y procainica + Estreptomicina- a una dosis de 20.000 U.I/Kg y 20 mg/Kg de peso corporal, respectivamente, cada 12 horas por 5 días, el cual no presentó ninguna complicación posterior.
Figura 3. Apariencia Miocroscópica del TCG obsérvese la alta vascularidad de la cápsula.
Figura 4. Corte sagital del TCG con presencia de quistes.
Evaluación Histopatológica
Se enviaron para estudio histopatológico muestras de diferentes sitios del tumor las cuales fueron fijadas en formalina buferada al 10% y embebidas en parafina, realizando cortes de 4µm las cuales fueron teñidas con H&E. Por microscopía de luz en los cortes histológicos, se observaron numerosas capas celulares y estructuras foliculares sólidas o microquísticas. Las células ubicadas hacia el centro de los folículos presentaban cantidad moderada a abundante de líquido ligeramente eosinófilo y una morfología redondeada o poliédrica.
En la periferia de los folículos se observó varias capas de células alargadas en disposición radial. Exteriormente a estas capas básales, se observó la presencia de células de la teca de apariencia ovoide o fusiforme. En el estroma que rodea los folículos se observaron fibroblastos y fibras de colágeno La cápsula del tumor presentó gran cantidad de tejido conectivo denso regular con presencia de vasos sanguíneos (Figura 5).
D I S C U S I Ó N
Aparentemente el diagnóstico del TCG no es difícil si se conoce los antecedentes del animal y se cuenta con adecuadas ayudas diagnosticas. No se conoce con precisión los factores involucrados en la patogénesis de las neoplasias ováricas, aunque se sugiere que el cese de la ovulación, mas un factor adicional, probablemente de tipo hormonal jueguen un papel importante (Risch, 1998 ). Estudios en seres humanos han revelado que existe una alteración en la expresión de los receptores de la proteinkinasa, por tanto, este mecanismo debería ser incluido dentro de la patogénesis (King, 2003)
La ultrasonografía fue de alto valor diagnóstico observándose presencia de folículos quísticos de apariencia anecogénica, los cuales semejan un panal de abejas, tal como ha sido descrito (White y Allen 1985; Hinrichs y Hunt, 1990; Mottershead, 2000). Aunque los niveles de inhibina no fueron analizados, un informe del Departamento de Reproducción Animal de la Universidad de Davis California, señala que la presencia del TCG puede ser diagnosticado en un 90% por los altos niveles de esta hormona. La inhibina normalmente es producida por las CG y su función es regular la secreción de FSH a nivel de la pituitaria, por tanto una yegua con TCG tendrá altos niveles de inhibina y bajos de FSH (McCue, 1992). Los altos niveles de inhibina podrían explicar el menor tamaño y la escasa funcional del ovario contralateral, ya que la FSH promueve esencialmente el desarrollo folicular.
Recientes estudios de biología molecular han demostrado que las células del TCG expresan mRNAs tanto para la subunidad acomo para la subunidad ß de inhibina, demostrando así el efecto sobre las gonadotropinas, este mecanismo en opinión de los investigadores podría ser utilizado en el futuro como modelo para el estudio de la regulación genética y avanzar en la génesis del tumor especialmente en humanos (Piquette et al., 2004).
El TCG secreta otra cantidad de hormonas como progesterona, estrógenos y androstenediona (Kennedy y Ganjam, 1975; Stabenfeldt et al., 1979; Neinecke y Gips, 1987; Bailey et al., 1997), lo que sugiere una correlación con los signos clínicos, de esta forma, las altas concentraciones de estrógenos deberían correlacionarse con estros prolongados y ninfomania, las bajas concentraciones de P4 (< 100 pg/ml) con escasa funcionalidad luteal y las altas concentraciones de testosterona con comportamiento agresivo y de macho. Algunos valores de referencia como niveles de inhibina > 0.7 ng/ml , testosterona > 50-100 pg/ml y progesterona < 1.0 ng/ ml sugieren un TCG (McCue , 2000).
Se ha sugerido que la determinación de inhibina sería de gran ayuda para establecer un diagnostico diferencial con otros problemas ováricos, por ejemplo con un hematoma ovárico, desafortunadamente en este caso, no fue analizada por la ausencia de disponibilidad de la prueba en el país por laboratorios especializados. El aumento en los niveles de testosterona permitió confirmar la naturaleza del tumor, aunque se cree que la inhibina es un marcador mucho más confiable (Mccue, 1992).
El tratamiento de elección es la ovariectomia unilateral, que puede ser realizada por la vía vagina -Colpotomia- fosa paralumbar o paramedial diagonal al vientre, dependiendo del diámetro del tumor, edad y temperamento de la yegua. La mayoría de las yeguas ovariectomizadas, debido a un TCG retornan a la actividad cíclica normal, pudiendo volver a la reproducción en la próxima estación de monta.
La extirpación quirúrgica suele tener carácter curativo y además de eliminar los tumores, corrige las anomalías del ciclo estral y del comportamiento, que suelen estar presentes debido a la cantidad variable de hormonas esteroides sexuales secretadas por los tumores. La cirugía fue la mejor decisión, tal como lo recomiendan diversos autores (Jones et al., 1997; Marcella, 2004) Lo cual no interfirió con la vida reproductiva de la yegua, pudiendo quedar preñada 6 meses después. Es importante advertir que si se permite un mayor crecimiento de este tumor, puede llevar a la ruptura de vasos sanguíneos y por consiguiente la muerte del animal.
Figura 5. Corte histológico del TCG. Obsérvese el grosor de la cápsula con fuerte presencia de tejido conectivo y vasos sanguíneos de diversos tamaños, coloración H&E 100x.
Finalmente la histopatología se constituyó en el diagnostico definitivo, caracterizado por un el crecimiento desordenado de células neoplásicas de forma ovalada o cuboidal y aumento de vasos sanguíneos y tejido fibroso a nivel de cápsula. Se recomienda finalmente un adecuado examen clínico, en la fase inicial del tumor, acompañado de unas buenas ayudas diagnosticas, las cuales permitan identificar prontamente el TCG, siendo la ovariectomía unilateral el mejor tratamiento. Las posibilidades de recuperación de la fertilidad son altas, con retorno a actividad reproductiva normal.
Figura 6. Corte histopatológico TCG de yegua. Obsérvese el crecimiento desordenado de células neoplásicas de forma ovalada o cuboidal con presencia de trabéculas de teji do fibroso. Coloración H&E100X.
Figura 7. Corte histopatológico Ovario, TCG de yegua. Obsérvese presencia de células neoplásicas arregladas en forma de rosetas, con restos de folículos y gran cantidad de trabéculas de tejido fibroso. Coloración H&E 100X.
AGRADECIMIENTOS
Los autores expresan los agradecimientos a la Doctora Carmen Molina MVZ , Profesora de Cátedra de la Escuela de MVZ de la Universidad de los Llanos. Al Doctor Pedro René Eslava- Mocha, MVZ, MSc. Profesor del Instituto de Acuicultura de los Llanos (IALL) por el apoyo en el diagnóstico patológico. Al Señor Carlos Izáquita histotecnólogo del IALL por el procesamiento de las muestras.
B I B L I O G R A F Í A
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